上海細胞劃痕實(shí)驗.

                           上海細胞劃痕實(shí)驗.
細胞劃痕實(shí)驗是一種簡(jiǎn)單易行的檢測細胞運動(dòng)的方法，可以用來(lái)檢測貼壁生長(cháng)腫瘤細胞的侵襲轉移能力。

上海細胞劃痕實(shí)驗.實(shí)驗內容：

材料：6孔板（其他的也可以，但感覺(jué)6孔比較好，大小適中），MARKER筆，直尺，20微升槍頭（滅菌），無(wú)血清培養基，PBS

步驟：能滅菌的器械都要滅菌。MARKER筆，直尺在操作前紫外照射30MIN（超凈臺內）

1.先用MARKER筆在6孔板背后，用直尺比著(zhù)，均勻地劃橫線(xiàn)，大約每隔0.5-1cm一道，橫穿過(guò)孔，每孔至少穿過(guò)5條線(xiàn)。

2. 在空中加入約5*105個(gè)細胞，具體數量因細胞不同而不同，掌握為過(guò)液能鋪滿(mǎn)

3. 第二天用槍頭比著(zhù)直尺，盡量垂直于背后的橫線(xiàn)劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜

4. 用PBS洗細胞3次，去除劃下的細胞，加入無(wú)血清培養基。

5.放入37度5%CO2培養箱，培養，按0. 6 .12 24小時(shí)取樣，拍照。

注意事項：

一般做劃痕實(shí)驗，一般都在無(wú)血清或者低血清狀態(tài)下培養的，否則細胞增殖就不能忽略

按照6孔板背后劃線(xiàn)的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點(diǎn)，作為固定的監測點(diǎn)，這就解決了前后觀(guān)察時(shí)位置不固定的問(wèn)題。